Monotemperatur Inkubation beim Umgebungsmonitoring - zulässig und sinnvoll?

Hintergrund

In der Mehrzahl der Fälle erfolgt derzeit die Bebrütung mikrobiologischer Proben aus dem Umgebungsmonitoring bei zwei Temperaturen. Annex 1 (2022) des EU-GMP-Leitfadens verlangt, dass die Auswahl der Probenahmestellen, die Häufigkeit der Probenahme, die Methoden und die Bebrütungsbedingungen auf einer Risikobewertung beruhen, die den Prozess, die Anlage und die typische Flora berücksichtigt. Seine Vorgaben werden teilweise dahingehend interpretiert, dass der Annex 1 zwei Temperaturen zur Bebrütung mikrobiologischer Monitoringproben ausdrücklich empfehle. Allerdings gibt der Annex 1 des EU-GMP-Leitfadens im Text keine konkreten Bebrütungstemperaturen oder Laufzeiten für die Proben aus dem Umgebungsmonitoring vor.

Aktuelle Diskussion

Seit einiger Zeit wird die Inkubation bei einer einzigen Temperatur als Alternative zur sequenziellen Inkubation untersucht, die typischerweise bei 20-25 °C und 30-35 °C erfolgt. Dies könnte die Arbeitsabläufe vereinfachen und Übertragungen sowie handhabungsbedingte Fehler reduzieren. Aktuelle Erkenntnisse deuten darauf hin, dass die optimale Temperatur vom Ort, vom Medium und von der mikrobiellen Flora abhängt. Eine multizentrische Studie stellte nach fünf Tagen keine signifikanten Unterschiede zwischen den Inkubationsregimen fest und sprach sich für 32,5 °C für die untersuchten Standorte aus. Eine andere Studie berichtete von einer guten Isolierrate der meisten getesteten Mikroorganismen bei Verwendung von TSA bei 25-30 °C´, über drei bis vier Tage. Ausnahmen bildeten Cutibacterium acnes und bestimmte Schimmelpilze, die spezifische Bedingungen oder Nährmedien erfordern. Eine Ein-Temperatur-Strategie erscheint daher praktikabel, sofern sie durch standortspezifische, risikobasierte Vergleichs- und Validierungsdaten gestützt wird. Wie sollte ein solcher Ansatz umgesetzt werden?

Die Umfrage

Um diese Frage zu klären, hat die ECA eine Umfrage ins Leben gerufen, um Beiträge von Aufsichtsbehörden, Pharma- und Biotechnologieunternehmen, Auftragslabors und Fachexperten zur Ein-Temperatur-Inkubation von Umweltüberwachungsplatten zu sammeln. Sie folgt einem risikobasierten, validierungsorientierten Ansatz, der mit dem EU-GMP-Anhang 1, USP <1116> und USP <1223> im Einklang steht.

Geschätzte Bearbeitungszeit: 5-7 Minuten. Die Antworten können in aggregierter Form ausgewertet werden, um ein Branchen-Benchmarking sowie Diskussionen über Validierung, behördliche Akzeptanz und Erwartungen hinsichtlich der Umsetzung zu unterstützen.

Quellen und Literatur

• Multicenter Study on Incubation Conditions for Environmental Monitoring and Aseptic Process Simulation, https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/27593691/
• Comparison of different incubation conditions for microbiological environmental monitoring, https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/25336415/
• The Rules Governing Medicinal Products in the European Union Volume 4 EU Guidelines for Good Manufacturing Practice for Medicinal Products for Human and Veterinary Use Annex 1 Manufacture of Sterile Medicinal Products
  https://www.gmp-compliance.org/files/guidemgr/20220825_gmp-an1_en_0.pdf
• Validierung der Inkubationsbedingungen: In-situ-Studie zu Abklatschplatten aus dem mikrobiologischen Umgebungsmonitoring https://www.ecv.de/suse_search.php?index=search&suseMode=form&form_section_all=X&form_autor=Goverde+M