DISKUSSIONSFORUM

AW: Monitoring

Beitrag von axel schroeder geschrieben am 16.9.2008 um 14:29

Originalbeitrag: Monitoring geschrieben von GmbP am 16.9.2008 um 10:31)

Real-Time PCR (Polymerase chain reaction)

Jede Spezies ist durch ihr Erbgut eindeutig charakterisiert, egal welche Struktur sie auf Grund von Umwelteinflüssen annimmt. Daher spielen molekularbiologische Nachweisverfahren immer dort eine entscheidende Rolle, wo es gilt, eine Lebensform eindeutig zu identifizieren, zum Beispiel in der Gerichtsmedizin, zur Bestimmung von Erbkrankheiten in Mumien, beim Nachweis bestimmter tierischer Bestandteile in Nahrungsmitteln oder von genetisch veränderten Pflanzen.
Unter den molekularbiologischen Methoden nimmt die PCR (Polymerase-Chain= Ketten-Reaktion) einen vorrangigen Platz ein. Das Verfahren beruht auf einer selektiven Vervielfältigung von DNA-Bruchstücken und wurde ursprünglich von Karry Mullis entwickelt, der dafür 1993 den Nobelpreis erhielt. Seither wurden vielfältige Variationen erforscht, die nicht nur den sehr spezifischen Nachweis von charakteristischen Erbgut-Sequenzen erlauben, sondern auch in vielen Fällen eine Quantifizierung möglich machen (Real Time PCR).

Diese Vielseitigkeit der PCR lässt sich seit Kurzem auch zum schnellen und empfindlichen Nachweis von Mikroorganismen nutzen. Mittels PCR können unterschiedliche Spezies trotz ihres manchmal sehr ähnlichen Aussehens, die sich zudem in Abhängigkeit von Umwelteinflüssen ausprägen kann, eindeutig identifiziert werden. Da die PCR unabhängig von Stoffwechselprozessen operiert, haben Faktoren wie Nahrungsangebot, Temperatur oder Feuchte keinen Einfluss auf das Ergebnis.

PCR Methoden gewinnen besonders durch die Zeitersparnis rapide an Bedeutung und werden von einigen pharmazeutischen Herstellern schon im Routineeinsatz genutzt. Allerdings gelingt mit den derzeit eingesetzten Verfahren die Bestimmung nur bis zur „Gattung“, nicht bis zur „Art“, was im Bereich des Monitorings für aseptische Herstellung, wo eine komplette Bestimmung gefordert ist zu Diskussionen führt.
Generell sind molekularbiologische Methoden die Basis vieler „Rapid Microbiological Methods“, die im Bereich der Qualitätssicherung moderner Arzneimittel und Therapien schnell an Bedeutung gewinnen.

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